产品货号:
YTB4648
中文名称:
RNase抑制剂
英文名称:
RNase Inhibitor, Human Placenta
产品规格:
2kU|10kU|50kU|200kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一种大肠杆菌重组表达的人胎盘RNase抑制剂,可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶结合,并抑制这些酶的活性,从而保护RNA不被这些酶降解。
本制品不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Aspergillus、S1 Nuclease、Taq DNA聚合酶、M-MLV反转录酶和SP6、T7、T3 RNA聚合酶的的酶活性。
本制品在pH5~8范围内保持其RNA酶抑制活性,在pH7~8时抑制活性最高。RNase抑制剂维持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。
本制品N端带有His-tag,反应完成后如有必要,溶液中的人胎盘RNase抑制剂可以通过相应的His抗体检测或通过磁珠、镍柱吸附去除。His标签蛋白的纯化推荐选购GoldBalb His标签蛋白纯化树脂或His标签蛋白纯化试剂盒(还原剂和螯合剂耐受型)以及His标签蛋白纯化树脂(变性剂耐受型)或His标签蛋白纯化试剂盒(变性剂耐受型)。
用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
由大肠杆菌表达,表达基因的来源为human placenta中编码该酶的基因。
将能够抑制5ng RNase A的50%活性的酶量定义为一个活性单位。
活性检测条件:100mM Tris-HCl (pH7.5),1.2mM EDTA,0.1mg/mL BSA,100ng/mL RNase A,0.1mg/mL E.coli [3H]-RNA,50mg/mL yeast RNA,8mM DTT。
组分 | 2kU | 10kU | 50kU | 200kU |
RNase抑制剂(40U/μL) | 50μL | 250μL | 1.25mL | 4×1.25mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期2年。
20mM HEPES-NaOH (pH7.5),50mM NaCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。
不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
- 75℃加热10分钟可以导致完全失活。
- 70℃加热10分钟仍会有微量活性残留。
- SDS和尿素等导致蛋白变性的试剂以及对氯汞基苯甲酸盐(p-chloromercuribenzoate)、重铬酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNA酶的结合。
- 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
- 酶储存溶液中加入DTT可保证RNase Inhibitor长期贮存的稳定性。
本制品与Thermo公司的RiboLock RNase Inhibitor以及Promega公司的RNasin Ribonuclease Inhibitor属于同类产品,都是重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂,对于RNase的抑制效果基本一致(参考图1和图2)。
图1.百奥莱博的人胎盘RNase抑制剂和同类产品对RNase A酶活性的抑制效果比较。5μg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1或0U RNase Inhibitor,在100μL的反应体系(50mM MOPS,5mM MgCl2,pH6.5)中,37℃孵育15分钟。反应完毕后立即取20μL反应液用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示,本制品与其他公司的竞品相比,具有类似的抑制RNA酶活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异,图中效果仅供参考。
图2.百奥莱博的人胎盘RNase抑制剂和同类产品对RNase A的酶活性的抑制效果比较。2μg Hela细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor,在20μL的反应体系(50mM MOPS,5mM MgCl2,pH6.5)中,37℃孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示,本制品与其他公司的竞品相比,具有类似的抑制RNA酶活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异,图中所示结果仅供参考。
对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为最终浓度1~2U/μl。
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